一、 儀（yí）器介紹

實驗目的：

本試驗是一項（xiàng）生殖細胞致突變試驗,用來檢（jiǎn）測受試物對整體哺（bǔ）乳動物生殖細胞的遺傳損傷,進一步確證體外試（shì）驗或其他試驗係（xì）統獲得的陽性結果,以評價受試物能否引起（qǐ）顯性致死突變（biàn）。

實（shí）驗概述：

哺（bǔ）乳動物發育中的精子在（zài）物理或（huò）化學因素作用下,發生染色體損傷,從而使受精卵在發育中死亡引起顯（xiǎn）性致（zhì）死的染色體損（sǔn）傷主要為染色體斷裂。顯性致死的主要表現是受精卵著床前丟失或著（zhe）床後胚

胎早期死（sǐ）亡。通過適當的途徑使雄性動物接觸受試物,然後與未經（jīng）染毒且（qiě）未交配過的雌性（xìng）動物交（jiāo）配,交配（pèi）結束後,取出雌性動物。雌性動物於妊娠後半期處死,剖開腹腔,取（qǔ）出子（zǐ）宮,檢査兩側子宮內的胚胎植入數著床數、早（zǎo）死胎、晚死胎和活胎數。雄性動（dòng）物（wù）每間隔一定（dìng）時間再與另一批（pī）未經染毒且未交配過的雌性動物（wù）交配,如此共進行數批,以保證覆蓋一個精子（zǐ）周期。

應用範圍

應用於科研、農業、衛生、教育、霧霾狀態可吸入顆粒染毒效果研究等各個領域

符合標準：

GB/T 15670.18-2017《農藥登（dēng）記毒理學（xué）試驗方法第18 部分:齧（niè）齒類動物顯性致死試驗》

二、試驗流程

1實（shí）驗動物：

物種: 通常選用性成熟的健康雄性大鼠或小鼠如SD大鼠、CD-1小鼠（shǔ）

數量: 每組至（zhì）少15隻雄鼠（shǔ），設多個劑量組和陰性/陽性對照組。

雌鼠: 需未交配過（guò）的健康雌鼠（shǔ），用於與雄鼠交配。

2給藥劑量分組:

至少設3個劑量組，高（gāo）劑量應出現輕（qīng）微（wēi）毒性如（rú）體重減輕（qīng）。

陰性對（duì）照組如體重減輕溶劑對照和陽性對照組如環磷酰胺、絲裂黴素C等已知致突變劑

給藥方式:通常為經口灌胃，連（lián）續給藥5~7天覆蓋精子發生周期不同階段

3交配程序

交配安排:雄鼠給藥後，按周次與未處理（lǐ）雌鼠交（jiāo）配每周更換一批雌鼠，共5~6批，以覆蓋精子發（fā）生全（quán）周（zhōu）期精原細胞一精（jīng）子（zǐ）。

交（jiāo）配比例:通常1雄（xióng）:2雌，每日檢查陰栓交配證據

4觀（guān）察指（zhǐ）標：

胚胎存活分析

雌鼠妊娠中（zhōng）期解剖，計數黃體數、著床數、活胎數和死胎數。

計算顯性致死率:

其他（tā）指標: 雄鼠體重、睾丸重量、精子質（zhì）量等,

5結果評價：

陽性結果:顯性致死（sǐ）率顯著升高如劑量依賴性增加，或某批交配周期異常，提示（shì）受試農藥可能誘發生殖細胞遺傳損傷。

陰性結果:需結合其他遺傳毒性試驗綜合評（píng）估（gū）。