一、 儀（yí）器（qì）介紹

實驗目的：

本試驗是一項生殖（zhí）細胞致突變試驗,用來檢測受試物對整體哺乳動物（wù）生殖（zhí）細胞的遺傳損（sǔn）傷,進一步確證體外試驗或其他試驗係統獲得的陽性結果,以評價受試物能否引起顯性致死突變。

實驗概述：

哺乳動物發育中的精子在物理或化學因素作用下,發生（shēng）染色體損（sǔn）傷,從而（ér）使受精卵（luǎn）在發育中死亡引起顯性致死的染色體損傷主要為染色體斷裂。顯性致死（sǐ）的主要表現是受精卵著床前丟失或著床後胚

胎（tāi）早期死亡。通過適當的途徑使雄性（xìng）動物接觸受試物,然後與未（wèi）經染毒且（qiě）未交配過的雌性動物交配（pèi）,交配結束後,取出雌性動物。雌性動物於妊娠後半期處死（sǐ）,剖（pōu）開腹（fù）腔,取出子宮,檢査兩側子宮內的（de）胚胎植入數（著床數）、早死胎、晚（wǎn）死胎和活胎數（shù）。雄（xióng）性動物每間隔一定時間（jiān）再與另一批未經染毒且未交配過的雌性動（dòng）物交配,如此共進行數批,以保證覆蓋一個精子周期。

應用（yòng）範圍（wéi）

應用於科研、農（nóng）業、衛生、教（jiāo）育、霧霾狀態（tài）可吸入顆粒（lì）染毒效果研究等各個領域

符合標準（zhǔn）：

GB/T 15670.18-2017《農藥登記毒理學試驗方法第18 部分:齧齒類動物顯（xiǎn）性（xìng）致死試驗（yàn）》

二、試驗流程

1）實驗動（dòng）物：

物種: 通常選（xuǎn）用性成熟的健康雄（xióng）性大鼠或小鼠（如SD大鼠（shǔ）、CD-1小鼠）

數量（liàng）: 每組至少（shǎo）15隻雄鼠，設多個劑量組和陰性/陽性對照組。

雌鼠（shǔ）: 需未交配過的健康雌鼠，用（yòng）於（yú）與雄鼠交配。

2）給藥劑量分組:

至少設3個劑（jì）量組，高劑量應出現輕微毒性（如體重減輕）。

陰性對照組（zǔ）如（rú）體重（chóng）減輕（溶劑對照）和陽性對照組（如環磷酰胺、絲裂黴素C等已（yǐ）知致突變劑）

給藥（yào）方式:通常為經口灌胃（wèi），連續給藥5~7天（覆蓋精（jīng）子（zǐ）發生周期不同（tóng）階（jiē）段）

3）交配程序

交配安排（pái）:雄鼠給（gěi）藥後，按（àn）周（zhōu）次與未處理雌鼠交配（每（měi）周（zhōu）更換一批雌鼠，共5~6批（pī）），以覆蓋精子發生全周（zhōu）期（精原細胞一（yī）精子）。

交配比例:通（tōng）常1雄:2雌，每日檢查陰栓（shuān）（交配證據）

4）觀（guān）察指標：

胚胎存活分析

雌鼠妊娠中期解剖，計數黃（huáng）體數、著床數、活胎數和死（sǐ）胎數。

計算顯性致死率:

其他指標: 雄鼠體重、睾丸重量、精子質量等,

5）結（jié）果評價：

陽性結果:顯性致死率顯著升高（如劑量依賴（lài）性增加，或某批交配周期異常（cháng）），提示受試農藥可能誘發生殖細胞遺傳損傷。

陰性結果:需結合其他遺傳毒性試驗（yàn）綜合評估（gū）。